Development of real time PCR assays for detection and quantification of transgene DNA of a Bacillus thuringiensis (Bt) corn hybrid in soil samples.

Zhu, B., Ma, B.-L., et Blackshaw, R.E. (2010). « Development of real time PCR assays for detection and quantification of transgene DNA of a Bacillus thuringiensis (Bt) corn hybrid in soil samples. », Transgenic Research, 19(5), p. 765-774. doi : 10.1007/s11248-009-9353-1

Résumé

Nous avons mis au point des épreuves de PCR en temps réel pour détecter et quantifier l’ADN transgénique d’un hybride (DKC42-23) de maïs (Zea mays L.) Bt (Bacillus thuringiensis) commercial issu de l’événement MON863. Ce maïs est également porteur du gène de la néomycine phosphotransférase (nptII). Nous avons utilisé les épreuves de PCR en temps réel pour examiner la persistance de l’ADN transgénique dans un essai au champ, d’une durée de trois ans, sur la culture du maïs hybride DKC42-23; nous avons également vérifié la transformation bactérienne naturelle. Les résultats de notre étude montrent que, dans des conditions de culture continue du maïs DKC42-23, l’ADN transgénique peut être détecté dans les parcelles d’essai tout au long de l’année. De plus, quand on a utilisé des extraits du sol cultivé en maïs DKC42-23 comme donneurs dans la transformation bactérienne, on a obtenu des transformants résistants à la kanamycine (KmR), ce qui signifie que le gène nptII du maïs DKC42 23 peut être acquis par des bactéries Pseudomonas stutzeri pMR7 naturellement compétentes qui l’intègrent à leur matériel génétique, de manière à ce que la résistance à la kanamycine de ces bactéries soit restaurée. Toutefois, après avoir cultivé une lignée de soja dans les même parcelles au cours de la saison de croissance suivante, la présence de l’ADN transgénique de l’hybride DKC42-23 a baissé jusqu’à ne plus être décelable à la fin de la saison. Par conséquent, les pratiques de rotation des cultures maïs-soja réduisent la disponibilité de l’ADN transgénique dans le sol et diminuent au minimum les risques de transfert génique horizontal. Les épreuves de PCR en temps réel sont utiles pour vérifier la persistance dans le sol de l’ADN transgénique issu de l’événement MON863.